母体血による無侵襲性胎児DNA診断法の開発　−第一報−

金沢医科大学，うきた病院＊，博医館ﾎｽﾋﾟﾀﾙ＊＊

高林晴夫，丹野治郎，桑原惣隆，浮田俊彦＊，丘村　誠＊，伊川和美＊，山藤　薫＊，五十嵐辰博＊＊

（目的）胎児DNA情報を得る方法として、これまで羊水穿刺法，絨毛採取法，胎児採血法が開発され、それぞれ臨床応用され多くの評価が行われてきたが、いずれの方法においても母体，胎児への侵襲性は皆無ではなく理想的な胎児DNA診断法とは言い難い。一方、妊婦血中に胎児赤血球，白血球，絨毛細胞が出現することは既に確認されているが、それら胎児細胞を選択的，純粋に分離，採取できたとの報告は未だみられない。そこで我々は、第１段階として胎児DNA情報を無侵襲，安全に母体血より分離，採取する方法の開発を試みた。

（方法）健常妊婦６０例，コントロールとして非妊婦１０例，男性１０例より同意の上2 ml採血し、Percoll不連続密度勾配比重遠心法により各層血球を分離，洗浄後、それぞれの沈渣よりPappenheim 染色標本を作製、鏡検し、有核赤血球の有無を調べ、micromanipulatorにより有核赤血球の採集を試みた。また胎児から母体への血液移行量を概算した。

（成績）1. コントロール血中より有核赤血球は発見されなかった。2.妊婦血中より有核赤血球は高率に発見された。妊娠８〜２３週 (33/39 例＝85%), 妊娠４〜７週，２４週以降 (0/21)。3.Percoll密度1.075/1.085 g/ml の界面より有核赤血球が回収された。4.標本上の有核赤血球の剥離，採集がmicromanipulator の使用により可能であった。5.妊娠８〜２３週の胎児から母体への血液移行量は0.001〜1 μl と概算された。

（結論）妊婦（8〜23週）血中から有核赤血球が高率に回収され、選択的，純粋に採取することが初めて可能となった。本法はPCR法，FISH法を応用した無侵襲性胎児DNA診断法の確立への扉を開くものであり、将来その普及が見込まれる。